DETERMINACION DE TP Y TPT

PRACTICA

DETERMINACIÓN DE TP & TPT 

INTRODUCCIÓN

Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citrato; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro calcio (CaCl₂) hasta la formación de coagulo de fibrina.

El tiempo de protombina (TP) o Tiempo de quick ha servido para determinar trastornos de coagulación, TP es la determinación más frecuente junto con la aPTT.

APLICACIÓN

TriniCLOT aPTT S es un equipo de prueba que se utiliza en la determinación del Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado (TTPA), y que consiste en un reactivo fosfolípido con activador en partículas y un reactivo de cloruro de calcio.

RESUMEN Y PRINCIPIO

La prueba de Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado (TTPA) es un procedimiento de screening universalmente aceptado que se utiliza para detectar anomalías en el sistema intrínseco de coagulación. Puede utilizarse también en pruebas de factores para detectar deficiencias de los Factores II, V, VIII, IX, X, XI y XII, pero es insensible al Factor plaquetario. Además puede utilizarse para detectar el anticoagulante de Lupus y se recomienda para controlar la terapéutica con heparina, ya que es sensible a la presencia de ésta. La prueba de TTPA no se recomienda para controlar la terapéutica anticoagulante oral ni es sensible a la disfunción plaquetaria. Estas condiciones se controlan mejor mediante una prueba de tiempo de protrombina o una prueba de tiempo de sangría, respectivamente. Reactivo TriniCLOT aPTT S se mezcla con plasma del paciente para proporcionar una activación uniforme óptima de la muestra. Después de la activación a 37°C durante cinco minutos, se inicia la reacción añadiendo CaCl2 TriniCLOT aPTT S. Se mide, en segundos, el tiempo necesario para la formación de coagulación.

REACTIVO

Para diagnóstico in vitro.

MATERIALES ADICIONALES NECESARIOS

• Micropipeta con puntas desechables, 0,1 ml
• Plasmas de control
• Plasma de Referencia y Plasma Deficiente en Factor (para pruebas de factores)
• Instrumentación para coagulación

MATERIALES DISPONIBLES

• Plasmas Deficientes en Factores
• Instrumentación para coagulación
• TriniCHECK Control Plasmas
• TriniCAL Reference Plasma

OBTENCIÓN Y ALMACENAJE DE MUESTRAS

Se deben obtener nueve volúmenes de sangre en un volumen de citrato de sodio al 3,2% (0,109 M). Inmediatamente después de obtener las muestras de sangre, las muestras se centrifugan a 1 500 x g durante 15 minutos. Consulte la versión más reciente del documento H21 de CLSI para obtener instrucciones adicionales sobre la obtención y el almacenaje de muestras.11

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA

1. Calentar previamente a 37°C un volumen suficiente de Reactivo TriniCLOT aPTT S y CaCl2 TriniCLOT aPTT S.
2. Etiquetar un tubo de ensayo para cada muestra (paciente y control) a analizar.
3. Pipetear 0,1 ml de muestra o control al tubo adecuado; a continuación, pipetear 0,1 ml de Reactivo TriniCLOT aPTT S a cada tubo.
4. Después de la activación, pipetear inmediatamente a cada tubo 0,1 ml de CaCl2 TriniCLOT aPTT S previamente calentado e iniciar simultáneamente el cronometraje para la detección de la coagulación mediante un método de detección conveniente. Anotar el tiempo, en segundos, transcurrido hasta que se detecta coagulación.

EVIDENCIAS 

RESULTADOS

El tiempo obtenido (en segundos) es el Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado del paciente.

Yameli Noeli Sotuyo Mata: 70 segundos

Leslie Ham Gálvez: 65 segundos

Héctor Javier Hernández Gómez: 29 segundos 

VALORES NORMALES 

El valor normal varía entre laboratorios. En general, la coagulación debe ocurrir entre 25 a 35 segundos. Si la persona está tomando anti-coagulantes, la coagulación tarda hasta 2 ½ veces más tiempo.

El tiempo de protrombina se mide en segundos. La mayoría de las veces, los resultados se dan como lo que se llama índice internacional normalizado (IIN).Si usted no está tomando anticoagulantes como warfarina, el rango normal para los resultados de TP es:

• 11 - 13.5 segundos, o
• IIN de 0.8 - 1.1

COMENTARIO 

Estos  métodos son de igual manera fáciles de realizar, pero son muy laboriosos, es muy impresionante ver cuando a determinados segundos se forma el coagulo. Me pareció una practica muy interesante, es algo nuevo para mi y espero seguir practicándola ya que me pareció muy buena. 

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 

http://modulo1operaequipos.blogspot.mx/2011/06/determinacion-de-tp-tpt-empleando-bano.html

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003652.htm

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003653.htm